阿尔茨海默病（AD）是一种常见的、发病机制不明的神经退行性疾病。早期诊断可以提高药物治疗效果，最大限度减缓痴呆症状。目前成熟的AD诊断方法包括正电子发射断层扫描脑成像和脑脊液分析，但存在费用高、技术限制多、对患者侵入性大等问题。泪液作为非侵入性临床样本，具有丰富的可溶性生物分子和低白蛋白含量，不易产生交叉反应，且采集简便、成本低廉。已有研究表明泪液中特定蛋白标志物与AD的发展阶段有重要联系，具有预测和监测AD进展的潜力。然而，从泪液中获取的样本量较少且蛋白浓度低，因此有必要对泪液中关键标志物进行高效富集和检测以实现AD早期诊断。

近期，韩国延世大学的研究团队在《Nature Communication》期刊上发表了题为“Amplified fluorogenic immunoassay for early diagnosis and monitoring of Alzheimer’s disease from tear fluid”的研究文章。该研究开发了一种自组装纳米颗粒介导的扩增荧光免疫测定法（SNAFIA），用于高效富集与高灵敏度检测临床泪液样本中的AD候选生物标志物，实现了AD的非侵入性早期诊断。

该研究共纳入60名受试者，包括发现队列21名受试者（7名健康对照、7名轻度认知障碍（MCI）患者和7名AD患者）和验证队列39名受试者（14名健康对照、15名MCI患者和10名AD患者）。通过对发现队列的临床泪液样本进行蛋白质组学分析鉴定出潜在的AD生物标志物腺苷酸环化酶相关蛋白1（CAP1）。在验证队列中使用SNAFIA免疫法对临床泪液样本的CAP1进行检测。SNAFIA免疫法由抗体固定化磁性纳米颗粒（Ab-MNP）和聚合物纳米探针（Ab-PNP）组成，与AD候选生物标志物形成夹心结构免疫复合物（Ab-MNP-CAP1-Ab-PNP），可从复杂样本中实现对CAP1的富集。通过裂解液处理PNP疏水膜上的Förster共振能量转移（FRET）染料对可提高SNAFIA测定法的灵敏度和选择性荧光信号放大，在1小时内可检测低至阿托摩尔浓度水平的CAP1蛋白。39名受试者的泪液验证了SNAFIA免疫法能够从健康对照组中识别出MCI患者和AD患者，AUC分别为0.7619和0.9714（p<0.0001），灵敏度分别为73.3%和90%，特异度均为100%。

该研究开发了一个集成磁分离系统和荧光纳米探针的免疫检测平台，有效富集并检测临床泪液样本中的AD生物标记物。此技术为无痛筛查AD患者及高风险人群以实现早期诊断和临床干预提供了新方案。

论文链接：https://www.nature.com/articles/s41467-023-43995-5

注：此研究成果摘自《Nature Communication杂志，文章内容不代表本网站观点和立场，仅供参考。