猴痘是一种由猴痘病毒(MPXV)感染引起的病毒性人畜共患病,通常表现为发烧、头痛、肌肉酸痛和皮疹等。自2022年猴痘爆发以来,116个国家和地区一共报道了9万多例病例,引起了世界卫生组织的广泛关注。目前常用的MPXV检测方法是实时定量PCR (qPCR)但需要昂贵的仪器和熟练的技术人员,限制了其在偏远地区的使用。因此,需要更为高效、便捷的检测方法,在资源有限的环境中实现MPXV的超灵敏检测。
近日,我国科学家在《Nature Communications》期刊上发表题为“Ultrasensitive single-step CRISPR detection of monkeypox virus in minutes with a vest-pocket diagnostic device”的文章。该研究开发了一个基于CRISPR的单步诊断平台SCOPE(Streamlined CRISPR On Pod Evaluation platform),用于皮疹液拭子、口腔拭子、唾液和尿液样本中MPXV的即时检测。
SCOPE系统将反应执行、信号采集和结果解释的全过程集合在一个装置中,减少了操作时间。将收集的样本进行2 min的病毒裂解处理,然后进行10 min的单步重组酶聚合酶扩增反应,在15分钟内就能检测到低至0.5 copies/μL (2.5拷贝/反应)的 MPXV。用SCOPE系统对102份临床样本进行了检测分析,结果与qPCR一致,灵敏度和特异度均为100%。
该研究开发了一种基于CRISPR的SCOPE检测平台,通过在小型无线设备上执行简化程序,几分钟内实现了MPXV的超灵敏检测。SCOPE显示出在有限环境中的使用潜力,将成为MPXV或其他病原体即时检测的有力工具,有望推动基于CRISPR的诊断技术在床旁环境中的实践应用。
论文链接:
https://www.nature.com/articles/s41467-024-47518-8
注:此研究成果摘自《Nature Communications》期刊,文章内容并不代表本网站的观点和立场,仅供参考。