自发性脊髓脑脊液漏（Spontaneous spinal CSF leak）是一种以硬脊膜结构缺陷为特征的疾病，可导致自发性颅内低压，其致残率和生活质量影响程度与多发性硬化相当。该病的影像学诊断复杂且具侵入性，治疗选择面临两难：硬膜外血补片仅能提供暂时缓解，而手术修复可及性有限且伴随风险。约三分之二的患者表现出全身性结缔组织病的临床特征，包括马凡综合征、Loeys-Dietz综合征等，提示细胞外基质蛋白的基因突变可能是该病的重要易感因素。然而，无明确结缔组织病诊断的自发性脊髓脑脊液漏患者的遗传基础尚不清楚。

近日，约翰霍普金斯大学医学院联合Cedars-Sinai医学中心等机构的研究团队在The Lancet Neurology上发表了题为"Spontaneous spinal CSF leaks: a rare variant exome sequencing study and functional analysis"的研究文章。该研究对42例1b型（侧方型）自发性脊髓脑脊液漏患者进行了全外显子组测序，并与三个独立对照队列（共3871人）进行比较。研究团队进一步利用AlphaFold2人工智能结构预测、体外整合素结合实验以及CRISPR-Cas9基因编辑构建的三种Fbn2点突变小鼠模型，系统验证了候选基因变异的功能影响。

结果显示，在42例患者中，9例（21%）携带FBN2基因的罕见功能性变异，显著富集于三个独立对照队列（Mendel发现队列OR=3.18，P=0.041；比利时全外显子组队列OR=3.55，P=0.004；比利时胸主动脉瘤队列OR=5.43，P=0.0003）。所有患者变异均定位于Fibrillin-2蛋白的最N端16%区域或TB结构域，且显著富集于TB结构域（P<0.0001），而cbEGF样结构域则显著减少（P<0.0001）。除G475S外，所有患者变异的CADD评分均超过20，表明其属于人类基因组中预测为最具破坏性的前1%变异。AlphaFold2结构预测显示，TB4 RGD结构域变异D1588V和TB7变异I2394T位于易于接触的蛋白环上。

体外功能实验表明，正常人硬膜成纤维细胞对野生型Fibrillin-2 TB4片段呈剂量依赖性粘附，而D1588V变异几乎完全消除该结合（P<0.0001）；同样，I2394T变异也显著削弱TB7片段的细胞结合能力（P<0.0001）。整合素鉴定实验证实TB4通过αvβ3整合素介导细胞粘附，TB7则通过αvβ3和αvβ5整合素。在小鼠模型中，三种Fbn2变异小鼠（Fbn2A1052T/+、Fbn2D1581V/+、Fbn2M2387T/+）的脑脊液漏发生率分别为79%、76%和73%，均显著高于野生型小鼠的57%（RR=1.27-1.38，均P<0.001），而马凡综合征模型小鼠（Fbn1C1039G/+）的漏发生率与野生型无差异。值得注意的是，Fbn2变异小鼠的漏严重程度（压力降幅）显著大于野生型和马凡小鼠，且其漏易感性不依赖于输注体积或压力，提示存在不同于马凡综合征的病理生理机制。

因此，研究团队认为，FBN2基因的功能性罕见变异是1b型自发性脊髓脑脊液漏的重要遗传风险因素，其通过破坏Fibrillin-2与硬膜成纤维细胞之间的整合素介导粘附，导致硬脊膜结构完整性下降。该发现将Fibrillin-2相关遗传性结缔组织病的表型谱扩展至自发性脑脊液漏，并与先天性挛缩性蜘蛛指症和腕管综合征形成表型关联。未来需在更大规模、多种族队列中进行验证，并探索FBN2基因检测在临床实践中的应用价值。该研究为自发性脊髓脑脊液漏的精准诊断和发病机制理解提供了重要的遗传学依据。

论文链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1474442226001407?via%3Dihub

注：此研究成果摘自 The Lancet Neurology 杂志，文章内容不代表本网站的观点和立场，仅供参考。